高含量谷胱甘肽(GSH-High)细胞治疗法

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高含量谷胱甘肽(GSH-High)细胞治疗法 2018-02-01T12:20:15+00:00

我们会持续开发新的尖端技术,荧光可逆巯基探针, 并应用于细胞治疗上.

 根据谷胱甘肽含量的不同分离出的细胞形式的功能也不一样。谷胱甘肽含量较高的细胞经氧化后能够更快地恢复到常态。

谷胱甘肽(GSH) FACS 分离
经分离后细胞谷胱甘肽的恢复

谷胱甘肽含量较高的细胞在其它细胞疗法(如下)中也有很多功能。

在干细胞内使用荧光可逆巯基探针TM 的好处

干细胞拥有一些基本的特性,例如自我复制并迁移到受损伤的区域进行组织修复。我们测试了拥有不同谷胱甘肽含量的干细胞的性能,发现谷胱甘肽含量较高的干细胞有更好的特性。

CFU Assay of Stem Cells with different levels of glutathione

CFU Assay results of GSH

  •  在用荧光可逆巯基探针TM 和 FACS 对细胞进行分离后,谷胱甘肽含量较高的干细胞 (hBM-MSC) 比低含量谷胱甘肽的干细胞多形成50%的群落,比未经分离处理的干细胞多出33%的群落。

Migration Test with different levels of glutathione

Migration results of GSH High Cells

  • 此外,使用荧光可逆巯基探针TM 测量谷胱甘肽含量并通过FACS 仪器分离出干细胞,我们测试了其针对不同试剂的迁移能力。24小时过后,谷胱甘肽含量较高的干细胞迁移的细胞更多。同时相比其它干细胞拥有更快的迁移速度。

谷胱甘肽含量高的干细胞有更高的干细胞特性,即更快的自我复制能力和更快的迁移速度。

利用荧光可逆巯基探针干细胞治疗哮喘病

目前为止,针对哮喘病还没有可治愈的方法,且只能避免病原刺激物或服用吸入皮质激素来控制。全世界,约有2亿5千万人患有哮喘病。

近来,干细胞疗法被证实能够缓解哮喘病的症状。因此,我们决定通过测试高含量谷胱甘肽干细胞来寻找更好的治疗方法。

在小老鼠实验中,我们利用 Poly I:C 进行病毒转染,从而激活肺部的免疫系统形成炎症——这种模型类似于哮喘病状态中发炎的肺部炎症。在24天的实验中,我们反复刺激其免疫系统。在实验的第14天,通过静脉注射将干细胞注入小鼠体内。直到第24天,免疫系统被激发了更多几次。

图下方所示:  细支气管(空气可以从此进入肺部) 显示为圆形圈。细支气管周围产生了炎症显示为粉色。

Control for GSH Asthma Test

  • 肺部没有收到刺激,同时细支气管没有炎症发生 (粉色分布比较均匀)。

Negative Control for the GSH Asthma Test

  • 肺部受到刺激,此实验没有注射干细胞。可以清晰地看到炎症的发生。

Unsorted (Naive) Stem Cells result in the GSH Asthma Test

  • 注射未经特性分离的干细胞,炎症所显示的颜色减弱了一部分。

GSH-Low Cells Result in Asthma

  • 注射低含量谷胱甘肽干细胞,类似于注射未经筛选的干细胞,炎症得到了一定的缓解。

GSH-High Stem Cells anti-inflammation cell therapy in Asthma

  • 注射了高含量谷胱甘肽干细胞以后,炎症减弱了许多,接近于正常水准。

通过荧光可逆巯基探针TM筛选出的高含量谷胱甘肽(GSHHigh)干细胞 能够更好地缓解肺部的炎症。

如果想了解更多有关高含量谷胱甘肽干细胞在哮喘病中益处,请查阅我们的学术论文。

高含量谷胱甘肽(GSHHigh)在神经元中的作用

谷胱甘肽及其相关酶的欠缺被认为是一些大脑疾病的重要病因,例如:自闭症,帕金森综合征,老年痴呆症,抑郁狂躁型忧郁症和精神分裂症等。

我们对经荧光可逆巯基探针TM分离出的高,中,低含量谷胱甘肽的老鼠胚胎干细胞(mESC) 进行了分析,并与未经分离的细胞进行了树突长度的比较。神经树突在大脑细胞间的交流起到很重要的作用,树突能够从其它细胞接受突触并将其转化为信号传到下一个神经元。

Stem Cell differentiation into Neurons

在原始态干细胞中,只有只能看到一小部分长出的树突。

GSH Low Stem Cells with low BII Tubulin

在利用低含量谷胱甘肽(GSHLow)干细胞进行的三次反复试验中,可知树突的生长受到了限制。

GSH-High Neurons showing improved dendrite formation

由高含量谷胱甘肽(GSHHigh)干细胞分化成的神经元有更多的树突。 高含量谷胱甘肽(GSHHigh)干细胞在治疗大脑疾病中可能会起一定作用。

利用荧光可逆巯基探针TM 进行抗氧化剂的筛选 / 食品内化合物以及药物的筛选 / 化妆品的筛选 

高含量谷胱甘肽的细胞(GSH-High)还有较多的功能,例如,利用化合物增加细胞内谷胱甘肽(GSH-High)的含量来得到高含量谷胱甘肽(GSH-High)的细胞或者增加谷胱甘肽恢复速率(GRC)。

利用抗氧化剂,食物中的化合物或化妆品中的化合物处理细胞24小时后,再加入氧化剂用以提供活性的谷胱甘肽(GSH),这样就能够测量谷胱甘肽恢复到正常水平的速度 

Video of Glutathione GSH recovery in cells, Redox Potential

  • 荧光可逆巯基探针TM 与谷胱甘肽GSH (F510) 结合后显示清晰的绿色荧光。加入氧化剂以后,荧光可逆巯基探针TM 便不会与谷胱甘肽GSH(氧化的 GSSG), 同时细胞的绿色荧光小时。由于细胞内的谷胱甘肽(GSH)可以再次生成,这时荧光可逆巯基探针TM 能够再次与谷胱甘肽(GSH)结合并且细胞的绿色荧光能够变得更亮。

GRC of Glutathione Compound Testing

  • 在测量谷胱甘肽(GSH)恢复能力时会追加氧化剂.  我们发现能够提高谷胱甘肽(GSH)恢复能力的化合物对细胞都有积极的影响。在本试验中,In this test,相比对照组,化合物B较少地受到氧化剂的影响,并且谷胱甘肽(GSH)的恢复能力多出了14%。类似于化合物B这样能够提升谷胱甘肽(GSH)含量的化合物,我们会添加到细胞培养液或化妆品的组份中,以改善细胞的活性。

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